DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞（STR鉴定）

Human Colorectal adenocarcinoma Epithelial Cells ,DLD1

 细胞介绍

DLD-1 是1977-1979年间D.L. Dexter和同事分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。

DNA fingerprinting和染色体组型分析表明这株细胞与HCT-15 相似，说明这两者是来自同一个人的不同克隆。

他们的遗传起源可通过DNA fingerprinting证实，但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记一致改变或数目上一致改变。

细胞的CSAp阴性(CSAp-)。 DLD-1 细胞的 p53 抗原表达呈阳性(p53 抗原产生了一个C -> T点突变导致241位的Ser -> Phe)。

角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。 癌基因c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis 和fos的表达呈阳性。 癌基因N-myc的表达未做检测。

表达肿瘤特异性核基质蛋白CC-2, CC-3, CC-4, CC-5 和 CC-6。

细胞特性 

培养基及培养冻存条件准备：

 细胞处理：

冻存细胞的复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

 （2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

4）注：请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  

                 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。

注：本产品仅供研究使用，不可用于人或动物的体外诊断与治疗。
      For labortory use only. Not for diagmpstic or therapeutic use.