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TF20141402

Neofect™ siRNA transfection reagent

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Neofect™ siRNA transfection reagent

产品介绍

Neofect™ siRNA transfec on reagent 一款专门用于siRNA转染试剂,转染效率高,细胞毒性低,在多种细胞系及原代细胞中都表现出良好的转染效果。

产品特征

 

转染效率高;细胞毒性低;无需换液,操作简单。

实验流程  (以6孔板为例)

1.细胞铺板

提前一天将细胞种植在6孔板中,以转染时细胞密度30%-70%为宜。

 

2.siRNA制备(可选)

使用RNase-free ddH20 溶解 siRNA干粉,终浓度为 20 uM。

 

即使用125 plddH20溶解10D(约 33 g 或2.5 nM) siRNA干粉充分震荡使其溶解

 

3.转染合体制备

1)准备2个无菌 EP 管,各加入100 pL OPTI-MEM 培养液,

2)第一管加入5pL Neofect,轻柔混合10次。

3)另一管加入5uLsiRNA(20pM)溶液,振荡混匀。4)将 Neofect混合液滴加到 siRNA 合液中,轻柔混,室温静置 30 min,转染复合体制备完成4.细胞转染

 

4.细胞转染

1)转染:将转染复合体滴加入细胞培养液中,轻摇混匀,转入CO2培养箱中继续培养。

2)换液(可选):若有明显细胞毒性,转染 12-24 h,更换成新鲜的细胞培养液。

3)验证:转染24-48 h,利用qPCR或Western blot 检测目的甚因表达水平

培养器皿

20uM siRNA(ul)

Neofectul

OPTI-MEM(ul)

24孔板

11-3

11-1.5

5050-100

6孔板

54-12

54-6

100100-200

Φ35mm培养皿

54-12

54-6

100100-200

Φ60mm培养皿

86-24

86-12

200200-400

 按照NeofectsiRNA(20uM)=1:1的体积混合,不同细胞可适当提高siRNA的用量进行优化。

储存安全

常温运输,储存于4℃,有效期18个月。

注:本产品仅供研究使用,不可用于人或动物的体外诊断与治疗。
      For labortory use only. Not for diagmpstic or therapeutic use.

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